広島菜の葯培養による効率的な不定胚形成及び植物体再生

［要約］: 広島菜（Brassica campestris）の葯培養は、１核期前期の未熟花粉を含む葯を、生長調節物質を含む修正B5培地に置床し、35℃１日間の前処理後、25℃暗黒下で培養すると、効率的に不定胚を形成し、植物体再生が可能である。

 広島県立農業技術センター・生物工学研究所・細胞工学研究室
 ［連絡先］0824-29-0521
 ［部会名］生物工学
 ［専　門］バイテク
 ［対　象］葉茎菜類
 ［分　類］研究

[背景・ねらい］: 　広島菜（Brassica campestris ）は、不結球ハクサイに分類される広島県特産のツケナであるが、根こぶ病が多発しており、抵抗性品種の育成が望まれている。葯培養等による半数体を利用した育種の手法は、形質固定の期間が短縮できるため、育種の効率化を図ることができる。そこで、広島菜の新品種育成に半数体育種手法を利用するために、葯培養による効率的な植物体再生の培養技術を確立する。

[成果の内容・特徴］

葯培養の方法は、0.1mg/l 2,4-D、0.1mg/l NAAを含む修正B5培地（Keller and Armstrong 1979）に葯を置床し、35℃で１日間前培養後、25℃の暗黒下で培養する（表１）。不定胚形成の向上には、エチレンの作用を阻害する硝酸銀を2.0～10.0mg/lの濃度で不定胚形成培地に添加すると効果がある。
不定胚形成に適した葯は，１核期前期の未熟花粉を含む葯で、花蕾の発育段階は、花弁長／葯長の比が1/3～1/2である（表２）。また，不定胚形成には、品種・系統間差が認められ、不定胚形成が良好な品種では、不定胚形成率が20%以上、1000葯当りの不定胚形成数が500個以上である（表３）。
不定胚からの植物体再生は、魚雷型，子葉期の不定胚を、植物生長調節物質を含まないB5寒天培地に移植すると、80%以上の不定胚が植物体に生育する。
再生植物体には半数体と２倍体が認められ、再生植物体の80～90%が半数体である。２倍体は自殖により後代が得られる。

[成果の活用面・留意点］

　広島菜の品種育成に利用し、育種年限を短縮することが可能になる。
　広島菜以外の不結球ハクサイに属するツケナ類にも活用できる。
　葯培養による不定胚形成効率には品種・系統間差がある。

［その他］
 研究課題名：組織培養手法等による野菜・花き・果樹の新品種育成
 予算区分  ：県単
 研究期間  ：平成８年度（昭和59～平成９年）
 研究担当者：長久  逸、桑田祐二、平尾　晃
 発表論文等：ヒロシマナの葯培養による不定胚形成及び植物体再生、広島県立農業技術センター研究報告、62号、1995.

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