- ［要約］
- 希釈平板法に必要な希釈操作を、試験管の代わりにピペットチップ内で行い、培養には培地付きフィルムを使用する。これらにより、微生物計数システムの小型化と、操作の簡易化ができる。
大阪府立農林技術センター・環境部・環境保全室
［連絡先］0729-58-6551
［部会名］生産環境
［専 門］土壌
［対 象］
［分 類］研究
- [背景・ねらい］
- 希釈平板法による土壌微生物の計数には、希釈用の試験管と培養用のシャーレを多数準備しなければならず、大型の滅菌装置や培養装置が必要である。また、希釈操作や培地との混合操作も煩雑である。
- そこで、微生物計数システムを小型化し、操作を簡易化する方法を検討する。
[成果の内容・特徴］
- 希釈操作のできる電子ピペットを使用して滅菌水900μＬ分取し、空気を吸い込んで接触を避け、続いて土壌懸濁液100μＬを分取する。これを培地に吐出すればピペットチップ内で希釈混合ができる（図１）。多段階の希釈が必要な場合には、マイクロチューブを併用する。
- 培地付きフィルム（３Ｍ社製、商品名ペトリフィルム）を使用することで、滅菌作業を省略でき、培養時の省スペース化が図れる（表１）とともに、培地調整・接種・計数・廃棄作業の簡略化が可能である（表２）。なお、本法と従来法の相関については、以下の文献に示されている。
- L.R.BEUCHAT,B.V.NAIL,R.E.BRACKETT and T.L.FOX，j.of Food Protection，53(10)， 864-874(1990)
- 木村吉希・岩城隆昌，実験動物技術，28(2)，147-150(1993)
[成果の活用面・留意点］
- この手法によって、実験者の技量に依存する部分を減らして「一般好気性細菌」や「カビ・酵母」等の微生物の計数を簡便に行うことができる。
- しかし、電子ピペットは、手動式ピペットと比べて高価であることや、培地付きフィルムは、使い捨てペトリ皿と比べて高価である、という問題点がある。
［その他］
研究課題名：有機物連用畑における微生物資材の併用試験
予算区分 ：国補（高度土づくり技術確立推進事業）
研究期間 ：平成８年度
研究担当者：内山知二、因野要一
発表論文等：電子ピペット，ＡＴＰ測定器，培地付きフィルムを組み合わせた微生物簡要計数法、
第92回日本土壌肥料学会関西支部会講演要旨、1996.
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