［成果情報名］

寒天培地接種によるダイズ茎疫病菌のレース検定法

［要約］寒天培地接種により、接種後10日以内に再現性の高いダイズ茎疫病菌のレース検定ができる。また、従来の土壌接種法に比べて判定期間を約10日短縮することが可能である。
［キーワード］ダイズ、ダイズ茎疫病菌、レース検定、寒天培地接種
［担当］兵庫農総セ・部長（生工）
［連絡先］電話0790-47-2413、電子メールTakuma_Sugimoto@pref.hyogo.jp
［区分］近畿中国四国農業・生物工学、生産環境（病害虫）
［分類］科学・参考

[背景・ねらい］
　ダイズ茎疫病菌のレース検定方法には土壌接種法や爪楊枝接種法があるが、発病判定にはかなりの時間を要する。判定時間の短縮と確実な検定を目的として、寒天培地接種によるダイズ茎疫病菌（兵庫県からの分離菌株）の病原性判定を検討する。

[成果の内容・特徴］

  1. 検定用培地はショ糖・寒天培地(各1.0%）80mlを1kg用マヨネーズ瓶に注入し、121℃、15分間加圧蒸気滅菌を行い、作成する。
  2. ダイズ種子を水洗し、70%アルコールで30秒間表面殺菌した後、有効塩素濃度1%の次亜塩素酸ナトリウム溶液に8分間浸漬して滅菌水で水洗し、種子消毒処理を行う。これをクリーンベンチ内で上記の培地に5粒ずつ播種し、23℃の恒温器で発芽させ、発芽後、培養室（温度：23℃、昼：16h、夜：8h、照度：50μEm-2s-1）で管理する。
  3. 播種後約10日目に初生葉を確認後、23℃、20日間培養した茎疫病菌の菌そうを3mm角に切り取り、ダイズの地際部を覆う程度に数個置床する（図1）。
  4. 発病調査は接種10日後に枯死または地際部の水浸状病斑形成により肉眼で判定し、発病株率が20%未満のものを抵抗性(R)、20%以上のものを罹病性(S)と判定する（図2）。
  5. 5菌株の病原性判定を行った結果、本方法は接種後、平均5.6日、遅くとも10日で発病を確認でき、土壌接種法に比べて約10日判定期間を短縮できる（表1）。
  6. 3種類の菌株を用いてレース検定を行うと、PJ-H04は北海道立上川農業試験場（土屋ら(1990))で報告されているレースB、PJ-H07はレースH、PJ-H10はレースAに該当する（表2）。

[成果の活用面・留意点］

  1. 本方法を用いたレース検定は最低2反復行う。
  2. 本方法は抵抗性品種の選抜方法として活用できる。また、品種の真性抵抗性遺伝子を探索する上でも利用可能である。
  3. 裂皮したダイズは雑菌混入しやすいので、検定には使用しない。

［具体的データ］


[その他］
研究課題名：各種遺伝資源利用による丹波黒ダイズへの病害抵抗性付与技術の開発
予算区分：県単
研究期間：2002～2006年度
研究担当者：杉本琢真、吉田晋弥、塩飽邦子
発表論文等：杉本ら(2003)関西病虫研報45：93-96

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