DNA マーカーによるイチゴ品種「アスカルビー」の識別

[背景・ねらい］

　奈良県で育成された「アスカルビー」は市場の評価も高く、栽培面積も増加している有望な品種である。育成者権保護あるいは不正表示の防止のためにもDNA による品種識別法の開発が望まれている。そこで、マルチプレックスPCR 法により「アスカルビー」と他の23 品種・1 系統とを識別可能なDNA マーカーを開発する。

[成果の内容・特徴］

1. 識別対象となるイチゴの葉片からゲノムDNA を抽出する。抽出したゲノムDNA をテンプレートとしてPCR 反応に供する。
2. 3 つのプライマー対（表1）を「アスカルビー」識別マーカーとしてPCR 反応液中に同時に混合し、PCR 反応を行う。PCR の反応条件は94℃で5 分間反応後，94℃・30 秒間，54℃・30 秒間，72℃・1 分間を30 回繰り返した後，最後に72℃・7 分間反応させる。
3. PCR 反応終了後，得られた産物の一部を1.5％アガロースゲルで電気泳動を行う。
4. 電気泳動終了後、ゲルを染色し、UV 照射下でバンドパターンを比較する。
5. STS19 マーカーでは「アスカルビー」および「ダナー」においてのみバンドを検出できない（図1）。
6. OPE19STS マーカーでは全ての品種で共通にバンドを検出でき、PCR 反応が成功していることを確認できる（図1）。
7. Gal マーカーでは「あかねっ娘」、「ダナー」および「宝交早生」でのみバンドを検出できる（図1）。
8. これら3 つのDNA マーカーを用いて、「アスカルビー」を他の23 品種・1 系統と識別することができる。

[成果の活用面・留意点］

1. 識別品種のサンプルは葉片に限らず、がく片や果実等、ゲノムDNA が抽出可能な組織であればいずれも識別可能である。
2. 識別可能な23 品種・1 系統以外の品種・系統について、識別の可否は検討していない。

［具体的データ］

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