花粉ベクター法によるユリの遺伝子導入個体の作出

［要約］
　
パーティクルガンで遺伝子導入したユリの成熟花粉は受精能力を持ち、胚を形成する。ハイグロマイシン耐性遺伝子（ＨＰＨ）を導入した花粉を授粉し、形成した胚はハイグロイシンＢで選抜できる。選抜個体からＰＣＲ法でＨＰＨ遺伝子と同様のバンドを持つ個体が得られる。     
愛媛県農業試験場・作物育種室
［連絡先］089-993-2020   
［部会名］生物工学  
［専門］バイテク
［対象］花き類
［分類］研究
［背景・ねらい］

花粉ベクター法は花粉に遺伝子を導入し生殖過程を利用して遺伝子組換え体を作出する方法である。この方法は培養を利用しない長所があり、培養が困難な作物にも利用でき、また培養変異の発生も無いため、作物改良に有効な遺伝子導入法として期待されているが、遺伝子導入個体の作出例は極めて少ない。
ユリで花粉ベクター法による遺伝子組換え体の作出を確立するため、パーティクルガンで遺伝子導入した成熟花粉の受精能力、ＨＰＨ遺伝子を導入した花粉を授粉して得られる胚のハイグロマイシンＢによる選抜効果さらに選抜個体の導入遺伝子の存在について調査した。

［成果の内容・特徴］
  1. パーティクルガンで遺伝子導入した成熟花粉は柱頭上で花粉管を発芽し、柱頭表苗から内部さらに花柱へと花粉管が伸び受精能力を有している（図1、2）。
  2. 遺伝子導入した花粉を授粉した場合の稔実率は、正常な花粉とほぼ同じである（表1）。
  3. ＨＰＨ遺伝子導入花粉から得られた胚の選択培地で生存する割合は、通常の胚に比較して5から20倍高くなる。ハイグロマイシンＢの選択培地への添加量は100mg/リットルが適している（表1）。
  4. ハイグロマイシンＢで選抜したユリの葉から簡便法でＤＮＡを抽出し、ＰＣＲ法により導入遺伝了と同様のバンドを有する個体が検出できる。その割合は、選抜個体の約4％である（図3）。

［成果の活用面・留意点］

  1. ユリでは耐病性遺伝子など有用な遺伝子を花粉に導入し授粉することにより、胚に遺伝子を導入できる。
 ［その他］
　
研究課題名：ユリ類のin vivoにおける遺伝子導入技術の開発
予算区分：国補（地域先端）
研究期間：平成11年度（平成9年度～平成11年度）
研究担当者：栗坂信之、浅海英記
発表論文等：パーティクルガンよるユリ類花粉への遺伝子導入条件と導入花粉の発芽能，育種四国談話会報，32，1999
　
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