プレスリリース
(研究成果) 豚熱およびアフリカ豚熱の同時診断が可能な新しい遺伝子検査法の開発

開発の社会的背景

アフリカ豚熱(ASF)は、アフリカ豚熱ウイルス(ASFウイルス)³⁾による豚やイノシシの熱性出血性伝染病で、極めて高い致死率を特徴とします。現在、ASFの流行が世界的に進み、世界最大の養豚国である中国を含むアジアにも感染が拡大していることから、今後、日本への侵入も懸念されるため、水際検疫などの防疫体制を強化する必要があります。一方、豚熱(CSF)はASFウイルスとは異なる豚熱ウイルス(CSFウイルス)⁴⁾による伝染病で、2018年に26年振りとなる発生が国内で確認された後も終息を見ることなく続発しており、2021年10月20日の時点で15県73例の発生が報告されています。このCSFの感染拡大には、豚だけでなく、野生動物、特にイノシシが農場へのウイルスの侵入に極めて大きく関与していることが示唆されており、現在、豚・イノシシ双方への対応が重要課題となっています。ASFとCSFは臨床症状が酷似するため、実用的かつ高精度な遺伝子検査法により、摘発を迅速化し、早期に防疫措置を実施する必要があります(図1)。

研究の経緯

ASFウイルスおよびCSFウイルスは極めて病原性が高いことから、両疾病の速やかな検知、摘発のため、都道府県の家畜保健衛生所では農研機構の協力のもとで従来型のPCR法(コンベンショナルPCR法⁵⁾)にもとづいた遺伝子検査の体制を構築しています。しかしながら、豚およびイノシシの検査件数が日増しに増加する現状にあって、検査精度を維持しながらも、防疫措置の発動の要否を早期に判断でき、かつ検査者の労力低減に資する、迅速で省力的な遺伝子検査法の開発を望む声が高まっています。そこで、農研機構とタカラバイオ株式会社は、現在の検査法における実用上の課題を克服すべく、新たな検査法の開発に取り組みました。

研究の内容・意義

今回、ウイルス核酸の精製を必要としない豚熱およびアフリカ豚熱の同時検出法を開発するために、タカラバイオ株式会社は同社が保有する遺伝子増幅技術や試料の処理にかかる技術を農研機構に提供し、両者が共同で検査系の開発を行うとともに、家畜由来の検体を用いて当該検査法の性能の実証試験を実施しました。その結果、

が確認されました。
この検査法を活用すれば、これまでそれぞれ6時間を要していたASFおよびCSFの判定・識別を、1回2時間の検査で実施できるようになります(図2)。
以上のことから、本検査法はウイルス核酸の精製を必要とせずにASFおよびCSFウイルスを同時にかつ高感度に検出可能であり、作業工程が大幅に簡素化されることが示されました。

今後の予定・期待

今回開発した検査法は、国が定める特定家畜伝染病防疫指針の診断マニュアルに記載されているリアルタイムPCR法として活用できるだけでなく、より簡便で迅速性が要求される遺伝子検出法としての適性を有することから、従来のPCR法に代わる検査技術として国や都道府県の病性鑑定施設で利用されることが期待されます。
この成果は、国内への侵入が警戒されるASFの侵入防止や早期の清浄化が望まれるCSFに対する効果的な防疫措置の実現への貢献につながるものと期待されます。

用語の解説

参考図