ガスクロマトグラフィにおけるカラム温度の変更による牛肉中微量脂肪酸の同定法

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要約

脂肪酸メチルエステルのガスクロマトグラフィ(GC)分析において摂氏150、160、170、180度など恒温のカラム温度条件下の4つのクロマトグラムの比較から、不飽和結合数の推定や脂肪族アルデヒドとの識別が可能である。

担当:九州農業試験場・畜産部・栄養・飼料研究室
(九州沖縄農業研究センター畜産飼料作研究部栄養生理研究室)
連絡先:096-242-7747
部会名:畜産,畜産・草地
専門:食品品質
対象:家畜類
分類:研究

背景・ねらい

近年、反芻動物に特徴的な共役リノール酸(CLA)という脂肪酸がガン予防効果を有するということで注目されている。しかし、牛脂肪中含有量は1%以下と微量であり、油脂給与牛の腎脂肪でCLAとC20:1は重複する。(図1:保持時間36.4分前後の矢印部分のピーク)これら微量脂肪酸の定量に際しては重複ピークの確認が不可欠であるが、一般的な水素炎イオン化検出器のGC測定では困難であり、その分析法が求められている。

成果の内容・特徴

脂肪酸は脂肪酸メチルエステル、リン脂質のプラズマロゲン由来の脂肪族アルデヒドはジメチルアセタール(DMA)に変換し、キャピラリーカラム「Chrompack製CP-Sil88forFAME」で測定した。なお、DMAは酸性触媒(例:塩酸メタノール法など)によるメチルエステル化によって産生される。
カラム温度を高くすることによって各脂肪酸の保持時間は2次曲線的に短縮されるが、その変化には違いがあり、出現順序の入れ替わりが確認される。(表1)
飽和脂肪酸を基準とするECL値は、カラム温度条件(恒温分析)の上昇に伴って、不飽和結合数の多い脂肪酸ほど増大し、脂肪族アルデヒドは減少する(図2)。特定の脂肪酸について温度条件とECL値の関連を調べることにより、その不飽和結合数を推定できる。
数段階の温度条件で重複ピークの出現がないことを確認することによって、単独ピークであることを推定することができる。