乾燥法によるカンショ胚様体の凍結保存

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要約

アブシジン酸(ABA)添加培地で誘導した「高系14号」の胚様体を相対湿度60%で約2週間乾燥すると、液体窒素中で凍結保存できる。保存した胚様体は発芽し、植物体に成長する。

担当:九州農業試験場・畑作利用部・甘しょ育種研究室
連絡先:0986-22-1506
部会名:作物生産、畑作
専門:育種
対象:いも類
分類:研究

背景・ねらい

現在実用化されている茎頂培養によるカンショのウイルスフリー苗生産にかわる技術として、胚様体を利用したより効率的な種苗生産システムを開発するには、胚様体の超低温下での保存技術が必要である。凍結保存に先立つ前処理として、乾燥法は特別な装置を必要としない簡便な手法であるが、これをカンショ胚様体に適用し、凍結保存を試みた。

成果の内容・特徴

オーキシン(1mg/l 2,4-D及びNAA)を含む培地で茎頂から作出したカルスをアブシジン酸添加改変MS培地で培養して得た胚様体は、摂氏15度または摂氏27度、相対湿度60%で約2週間乾燥すると、水分含量は約9%になり、摂氏-196度の液体窒素中で凍結保存が可能になる(写真2)。
保存した胚様体の約30～40%はホルモンフリーMS培地で発芽し、植物体に成長する(表1及び写真1)。
乾燥温度は摂氏15度の方が、摂氏27度に比べて発芽率が約4%ほど高い(表1)。
サイズの大きい胚は、凍結保存後の発芽率が高い(表2)。
凍結保存により、胚様体由来の植物体で葉形、いもの形状や結藷性など形態的な異常が増えることはない(表3)。