QoI剤耐性チャ輪斑病菌の遺伝子診断法

要約

チャ輪斑病菌のQoI剤耐性菌には、それぞれ異なる遺伝子変異による高度耐性菌と中度耐性菌の2種類が存在する。Multiplex PCR-RFLP分析により、これらの耐性菌を判別できる。

アゾキシストロビン水和剤をはじめとするQoI剤は、チャ輪斑病の防除において基幹薬剤として広く用いられているが、耐性菌の出現によるQoI剤の効力低下が問題となっている。そこで、QoI剤耐性チャ輪斑病菌の特性を解析するとともに、耐性菌を迅速・簡便に検出するための遺伝子診断法を開発する。

チャ輪斑病菌のQoI剤耐性菌には、QoI剤感受性が著しく低い高度耐性菌とやや低い中度耐性菌の2種類が存在する(図1)。
耐性菌は、QoI剤の作用点であるチトクロームbの遺伝子変異によって生じる。チャ輪斑病菌のチトクロームb遺伝子にはエキソン-イントロン構造の異なる2つのタイプがあり、いずれにおいても高度耐性菌はG143A変異、中度耐性菌はF129L変異に起因する(図2、3)。
既存のプライマーRSCBF1およびRSCBR2(Ishii et al. 2001, Phytopathology 91:1166-1171)に新規プライマーPlcbinR(5'-GCATAAAATCTATCAGTAGATGCAGAA-3')およびPlcbinF(5'-GCTTAATGCACAGTCGGAACT-3')を加えた4種類のプライマーと、制限酵素Fnu4HIおよびScrFIを用いたMultiplex PCR-RFLP分析により、これらの耐性菌を判別できる(図2、3)。

図1～3